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西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院

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全自動細胞DNA定量分析系統(tǒng)原理和應(yīng)用

時間:2012-10-31 15:58來源:求醫(yī)網(wǎng)

  一、細胞DNA定量分析系統(tǒng)技術(shù)原理

  每一個正常的體細胞核內(nèi)均有23對染色體,只有增殖期的細胞才會有染色體的復(fù)制和加倍。但在生理狀態(tài)下,人體絕大多數(shù)的細胞處于靜止期,DNA含量相當(dāng)恒定。當(dāng)致癌因素作用于細胞早期,細胞核內(nèi)DNA結(jié)構(gòu)和含量發(fā)生改變,最終發(fā)展為細胞形態(tài)異常和惡性增殖。因此,細胞DNA定量分析系統(tǒng)可通過測量細胞核內(nèi)DNA含量的變化,在形態(tài)改變不明顯前即可檢測出那些病變細胞,實現(xiàn)癌及癌前病變的早期診斷。

  

  圖1 細胞DNA含量

  癌癥是一種染色體疾病,致癌物質(zhì)、罕見的遺傳病癥以及偶發(fā)的有絲分裂錯誤都是通過產(chǎn)生非整倍體引發(fā)腫瘤的,是一個漫長的過程。

  

  圖2 腫瘤發(fā)生發(fā)展示意圖

  非整倍體讓數(shù)以千計的基因和它們編碼的蛋白處于失衡狀態(tài),為細胞發(fā)展成更嚴重的非整倍體創(chuàng)造了條件。然而,從非整倍體早期發(fā)展成惡性腫瘤需要較長的時間,在這段時間,醫(yī)生可以從容地進行檢查和實施外科手術(shù)。在癌癥早期,還可以通過檢查非整倍體來區(qū)分惡性腫瘤和“相貌雷同”的良性腫瘤。當(dāng)癌癥進入晚期,檢查與耐藥或轉(zhuǎn)移性相關(guān)的非整倍體,醫(yī)生就可以選擇最適合的治療方案。因此,早期發(fā)現(xiàn)DNA含量異常細胞對于腫瘤的防治具有重要的價值---- P. Duesberg, Chromosomal chaos and cancer, Sci Am 296 (), pp. 52-59.

  二、全自動DNA定量分析技術(shù)

  全自動細胞DNA定量分析系統(tǒng)是由麥克奧迪集團**引進加拿大不列顛哥倫比亞腫瘤研究院(BCCA)的腫瘤早期診斷新技術(shù)。該系統(tǒng)通過對細胞核內(nèi)遺傳物質(zhì) (DNA )倍體定量檢測,判斷細胞的生理狀態(tài)和病理改變、檢測癌及癌前病變。

  

  圖3 Motic全自動細胞DNA定量分析系統(tǒng)

  系統(tǒng)特征

  ? 自動化程度高、結(jié)果可靠,可重復(fù)性好;

  ? 克服人工觀察主觀性強、可重復(fù)性差的缺點,大大提高病變檢出率;

  ? 操作簡便、速度快,操作者無需細胞學(xué)診斷經(jīng)驗;

  ? 報告結(jié)果圖形化處理,便于解讀;

  ? 檢測出早于形態(tài)變化的細胞核DNA含量變化的情況。

  本系統(tǒng)還可通過評價細胞核各參數(shù)改變的程度,對腫瘤預(yù)后進行判斷,指導(dǎo)腫瘤的治療。其操作簡便,敏感性高,是癌及癌前病變篩查的有效工具。可針對包括宮頸脫落細胞在內(nèi)的多種婦科及非婦科臨床細胞學(xué)標本進行檢測。已廣泛應(yīng)用于歐美等發(fā)達國家的臨床診斷,并已獲SFDA認證,是“宮頸癌防治工程”、“中華醫(yī)學(xué)會婦科腫瘤學(xué)分會”、“健康扶貧工程組委會”等優(yōu)秀機構(gòu)進行宮頸癌篩查的指定技術(shù)。

  三、細胞DNA定量分析技術(shù)在腫瘤早期檢測中的優(yōu)勢

  

  圖4 傳統(tǒng)的細胞學(xué)人工在顯微鏡下診斷的特點

  

  圖5 細胞DNA定量分析系統(tǒng)診斷優(yōu)勢

  四、細胞DNA定量分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用價值

  檢測出早期癌前病變細胞和癌細胞:在細胞惡變過程中,遺傳物質(zhì)(DNA)含量早于細胞形態(tài)發(fā)生改變,80-90%的惡性實體腫瘤內(nèi)存在非整倍體細胞。這種細胞的出現(xiàn)是提示早期惡性病變的重要標志。因此,可通過細胞DNA定量分析系統(tǒng)檢測對細胞DNA進行定量分析發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)早期癌前病變細胞和癌細胞。

  腫瘤的惡性程度及預(yù)后評估:整倍體腫瘤其預(yù)后通常較非整倍體腫瘤好。

  指導(dǎo)腫瘤的治療:經(jīng)放、化療治療后,非整倍細胞是否消失直接反映治療的效果好壞。

  提高細胞學(xué)檢測工作效率:僅需對約10%的可疑或陽性病例進行復(fù)核,減輕醫(yī)生勞動強度。

  五、主要用途

  (1) 用于婦科宮頸癌篩查;

  (2) 用于非婦科的其他脫落細胞學(xué)的癌及癌前病變檢測

  (3) 更廣泛的臨床應(yīng)用:

  1) 表面刮取標本片:例如陰道、宮頸、口腔、肛管、鼻咽部、眼結(jié)膜、體表病灶潰面等處。

  2) 分泌物或排泄物標本片:例如痰液、尿液、前列腺液、肛腸膿血排泄物、腫瘤之漏管分泌物、乳頭溢液等。

  3) 在體表或體腔內(nèi),液體或腫瘤實體的針吸穿刺檢查:例如胸腔、腹腔、四肢、軀干、肺、肝、脾、腎等。

  4) 內(nèi)窺鏡直視下的刷片及組織印片:例如食管、胃、支氣管、泌尿道、結(jié)腸、直腸等。

  

  圖6 細胞DNA定量分析系統(tǒng)的應(yīng)用

  六、DNA定量細胞學(xué)檢測報告解讀:

  該技術(shù)敏感性大于95%。液基薄層制片后,可同時做常規(guī)細胞學(xué)診斷,一份標本,兩項檢測。實現(xiàn)優(yōu)勢互補,提高病變檢出率。報告診斷建議明確清晰,易于解讀。

  (1)正常細胞DNA指數(shù)值(DI)多為1,DNA指數(shù)值大于2.5為異常細胞。

  (2)臨床建議:

  a) ≥3個異常細胞或者細胞增殖比例大于細胞總數(shù)的10%,建議進行陰道鏡檢查及活體組織檢查;

  b) 1-2個異常細胞或細胞增殖比例在5-10%之間,建議4-6個月進行復(fù)查,以便明確原因;

  c) 無異常細胞,則可定期進行正常篩查(2-3年)。

  七、DNA定量分析報告

  

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